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Listeria monocytogenes 신속 검출을 위한 면역크로마토그래피법의 개발

원문정보

Development of Immunochromatography for the Rapid Detection of Listeria monocytogenes

최진길, 심원보, 제정현, 김지영, 이규호, 김민곤, 하상도, 김근성, 김광엽, 김철호, 정덕화

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초록

영어

The objective of this study was the development of immunochromatography (ICG) for the rapid and accurate detection of Listeria monocytogenes. Here, monoclonal antibodies (MAb) were conjugated with 40 nm colloidal gold particles, where the conjugate was used as the detection reagent in the ICG. The ICG was composed of three pads (sample, conjugate, and absorbance pads) and one nitrocellulose membrane. The colloidal gold-MAb conjugate was applied to the conjugate pad, and the test line and control line on the membrane were treated with MAb (FKLM-3BI2-37) and anti-mouse IgG, respectively. The detection limit of the ICG was 105 cell/mL and it showed no cross-reaction to food borne pathogens. We inoculated meat and lettuce samples with various counts of L. monocytogenes, and analyzed them by ICG. All the inoculated meat samples gave positive results after enrichment for 24 h in LEB. These results indicate that ICG was able to serve as a primary screening tool for L. monocytogenes in various foods and agricultural products within 20 min after enrichment.

한국어

본 연구에서는 L. monocytogenes를 신속하게 분석할 수 있는 면역크로마토그래피법을 개발하고자 하였다. 먼저 L. monocytogenes에 대한 단크론성 항체(FKLM-3B12-37)를 개발하여 직경 40nm로 제작된 colloidal gold와 합성한 후 conjugate pad에 처리하였고 nitrocellulose membrane 상의 test line과 control line에 단크론성 항체와 anti-mouse IgG를 각각 처리하여 면역크로마토그래피법을 개발하였다. 개발된 면역크로마토그래피법의 검출한계는 105 cell/mL 수준까지 검출이 가능했으며 다른 식중독 세균과는 교차 반응이 없는 것으로 나타났다. 임으로 오염시킨 식품시료의 경우 증균과정 없이 104 cell/25g까지 바로 분석하는데 어려움이 있으며 24시간의 증균과정을 거친 후에는 104 cell/25g까지 검출할 수 있었다. 본 연구에서 개발된 면역크로마토그래피법은 24시간의 증균 만으로 식품에 오염되어있는 L. monocytogenes를 검출할 수 있는 것으로 사료되었고, 기존의 식중독균 진단방법에 비해 신속하고 간편하게 그 결과를 확인할 수 있었다.

목차

Abstract
 서론
 재료 및 방법
  면역항원준비
  단크론성 항체 생산
  Colloidal gold와 항체 결합체 준비
  면역크로마토그래피법 개발
  L. monocytogenets 양성 시료 분석
 결과 및 고찰
  단크론성 항체의 특성
  Colioidal gold와 항체 결합체 확인
  면역크로마토그래피의 최적화
  교차반응과 검출한계
  임의로 오염시킨 시료의 분석
 요약
 참고문헌

저자정보

  • 최진길 Jin-Gil Choi. 경상대학교 대학원 응용생명과학부(BK21)
  • 심원보 Won-Bo Shim. 경상대학교 대학원 응용생명과학부(BK21)
  • 제정현 Jung-Hyun Je. 경상대학교 대학원 응용생명과학부(BK21)
  • 김지영 Ji-Young Kim. 경상대학교 대학원 응용생명과학부(BK21)
  • 이규호 Kyu-Ho Lee. 한국외국어대학교 환경학과
  • 김민곤 Min-Gon Kim. 한국생명공학연구원
  • 하상도 Sang-Do Ha. 중앙대학교 식품공학과
  • 김근성 Keun-Sung Kim. 중앙대학교 식품공학과
  • 김광엽 Kwang-Yup Kim. 충북대학교 식품공학과
  • 김철호 Cheol-Ho Kim. 성균관대학교 생명과학과
  • 정덕화 Duck-Hwa Chung. 경상대학교 대학원 응용생명과학부(BK21)

참고문헌

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