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산수유에 함유된 항암물질의 정제 및 특성

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Purification and Characterization of Anticarcinogenic Compound from Corni fructus

김병현, 박경욱, 김재용, 정일윤, 양기호, 조영숙, 이성태, 서권일

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초록

영어

Chloroform layer from methanol extract of Corni fructus (Cornaceae) showed strong antiproliferation effect on human cancer cell lines by SRB assay. Anticarcinogenic-active compound was isolated and purified by silica gel column and thin layer chromatograpies, and identified as ursolic acid (3β-hydroxyrus-12-ene-28-oic acid, MW:456) by mass and IR spectrophotometries, and 1H-and 13C-NMRs. The compound inhibited proliferation of A549 (human lung cancer cell line) and MCF-7 (human breast cancer cell line) cells in dose-dependant manner when treated for 48 hr. Inhibition rates of both cells were over 40% and 90% compared with control cells at the 30 μg/mL and 100 μg/mL, respectively. Morphology of cells treated with the compound for 15 hr at 10 μg/mL was distorted with shrinked cell mass, and cell number was lower than that of control cells. Cell cycle analysis showed sub-G1 phase arrest in both cell lines following 15 hr exposure to the compound, % of cell phase increased to 11.7 and 11.2% compared to the control of 4.0% and 2.1% in A549 and MCP-7 cells, respectively.

한국어

암세포 성장 억제효과가 인정된 산수유 methanol 추출물의 chloroform층으로부터 silica gel column과 thin layer chromato-grapies를 이용하여 항암활성물질을 분리하고, IR, mass spectrometer, 1H-NMR 및 13C-NMRs을 통해 순수물질을 동정하였다. 이 물질은 triterpenoid로서 C30H48O3의 구조식을 가진 화합물로 분자량이 456인 ursolic acid(3β-hydroxyrus-12-ene-28-oic acid)로 동정되었다. 정제된 화합물을 A549 및 MCF-7 암세포주에 48시간동안 처리한 결과 농도 의존적으로 암세포주의 성장을 억제하였으며, 화합물을 처리하지 않은 대조구에 비하여 30 μg/mL농도로 처리시 40% 이상 그 성장을 억제하였으며, 100 μg/mL농도로 처리시 90% 이상 그 성장을 억제하였다. 정제 화합물을 처리한 암세포를 광학현미경으로 관찰한 결과 뚜렷한 세포수의 감소와 함께 심한 형태학적 변화가 관찰되었다. 암세포 주에 정제시료를 10 μg/mL농도로 처리하고, 15시간 배양한 후 세포주기를 분석한 결과 sub-G1 phase의 비율이 A549의 경우는 대조구에서 4.0%이었던 것이 11.7%로, MCF-7의 경우는 대조구에서 2.1%이었던 것이 처리구에서는 11.2%로 각각 증가된 것으로 나타나 정제물질은 apoptosis에 의한 세포사멸 유도를 시사하였다.

저자정보

  • 김병현 Kim, Byeong-Hyeon. 순천대학교 한약자원학과
  • 박경욱 Park, Kyung-Wuk. 순천대학교 식품영양학과
  • 김재용 Kim, Jae-Yong. 순천대학교 기초과학연구소
  • 정일윤 Jeong, Ill-Yun. 한국원자력연구소 방사선식품.생명공학기술 개발팀
  • 양기호 Yang, Gi-H. 순천대학교 한약자원학과
  • 조영숙 Cho, Young-Sook. 순천대학교 식품영양학과
  • 이성태 Yee, Sung-Tae. 순천대학교 생물학과
  • 서권일 Seo, Kwon-Il. 순천대학교 식품영양학과

참고문헌

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