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국내산 키위에서 추출한 protease 조효소액의 안정성과 최적화에 관한 연구

원문정보

Stability and Optimization of Crude Protease Extracted from Korean Kiwifruits

김미현, 노정해, 송효남

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초록

영어

In the study, the protease activity of kiwifruit (Actinidia deliciosa Planch) cultivated in Korea was estimated, with specific examination of proteolytic effects on myofibrilar protein. The crude protease extract of kiwifruit was prepared in two ways; one in which the kiwifruit was homogenized with buffer followed by centrifugation, and the other were the supernatant was precipitated by saturated ammonium sulfate followed by dialysis. The former had 21.23 mM/mL of protease activity, which corresponded to 112.28 mM/g kiwifruit utilized, and the latter had 11.58 mM/mL and 45.80 mM/g of kiwifruit. The crude protease extract of the kiwifruit showed high specificity for casein substrate followed by bovine serum albumin, egg white, collagen, and elastin, in order. The enzyme lost proteolytic activity in acidic conditions such as pH 2-3, and at high temperatures over 60oC. It showed optimal activity in both pH 3.0 and pH 7.5 as well as at 40oC for casein substrate and at 50oC for myofibrilar protein substrate. The proteolytic activity toward casein was high with up to 0.5M salt, followed by a sharp decrease beyond this concentration. On the other hand the proteolytic activity for myofibrilar protein decreased steadily with increasing of salt concentration. Kiwifruit has been used as a for meat tenderizer for in home cooking and these results support the its tenderizing effectiveness of kiwifruit especially for Korean style marinating of meat for cooking.

한국어

본 연구는 국내산 키위에서 추출한 protease의 특성을 규명하고자 실시하였으며 지금까지 연구되어 오지 않은 근원섬유에 대한 단백분해 활성을 측정하였다. 국내산 키위 crude 효소액은 시료를 buffer에 넣고 균질화한 원심분리액과 포화황산암모늄 처리후 투석한 두 단계의 시료로 나누었다. 각각은 21.23 mM/mL와 11.58 mM/mL의 활성을 나타내었고 이를 처음 사용하였던 키위의 양으로 환산하면 112.28 mM/g kiwifruit과 45.80 mM/g kiwifruit이었다. 국내산 키위 crude 효소액의 기질에 때한 특이성에서 는 카제인과 근원섬유에 대해 높은 활성을 보였으며 그 다음으로 bovine serum albumin, egg white, collagen, elastin 순이었다. 국내산 키위의 단백분해 효소는 pH 2-3에서는 실활하였으며 60oC이상의 온도 범위에서는 급격히 실활하였다. 국내산 키위 crude 효소액은 pH 3.0과 pH 7.5 두 곳에서 최적활성을 나타냈고, 최적온도는 카제인을 기질로 한 경우 40oC에서, 근원섬유 50oC에서 최적온도를 나타냈다. 키위 단백질 분해 효소의 카제인에 대한 활성은 염도가 0.5M일 때까지 매우 높다가 급격히 떨어졌으
나 근원섬유에 대한 활성은 염의 농도가 높아짐에 따라 서서히 떨어졌다. 키위는 조리중에 연육작용을 위하여 주로 쓰여지고 있으며, 위의 결과로써 우리나라 육류조리와 같이 재워두는 육류조리방법에도 키위가 좋은 연육효과를 나타낼 수 있음을 보였다.

목차

Abstract
 서론
 재료 및 방법
  재료
  단백질 분해 조효소액의 추출
  기질용액의 조제 및 단백분해효소 기질 선택성
  효소의 단백 분해 활성
  근원섬유의 제조
  효소의 안정성
  효소의 최적 활성
 결과 및 고찰
  키위의 단백분해 효소 추출
  키위 단백분해 효소의 기질 특이성
  키위 단백분해 효소의 안정성
  효소활성에 대한 최적화
  효소활성에 대한 염 농도의 영향
 요약
 문헌

저자정보

  • 김미현 Mi Hyun Kim. 한국식품연구원
  • 노정해 Jeonghae Rho. 한국식품연구원
  • 송효남 Hyo-Nam Song. 세명대학교 한방식품영약학과

참고문헌

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