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장내세균의 락토오스 분해 유전자 확인 연구

원문정보

A Study on the Identification of Lactose-degrading Genes in Enterobacteriaceae

고유라, 김가은, 현성희

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초록

영어

Tests for lactose degrading abilities are typically MacConkey medium culture and ONPG test. However, Some enterobacteriacaes show different biochemical properties of the two tests even though they degrade lactose. Lactose degradation ability was confirmed using 12 strains, including Escherichia coli. The rapid fermentation ability of lactose was observed through proliferation and color changes of neural red, which is a pH meter in MacConkey agar medium. The low fermentation ability of lactose was observed through ONPG disk. DNA of 12 strains, including Escherichia coli, was extracted and Lac Z and Lac Y genes were confirmed by PCR amplification and sequencing of amplified products. In five strains including Escherichia coli, both β-galactosidase and lactose permease genes were identified as MacConkey agar and ONPG test were both positive. In four other strains including Edwardsiella tarda, MacConkey agar and ONPG test both negative, and neither β-galactosidase nor lactose permease genes were identified. Serratia marcescens was negative for MacConkey agar and positive for ONPG test, and not lactose permease gene, but β-galactosidase gene was identified. Klebsiella pneumoniae is MacConkey agar positive and ONPG test positive, and both β-galactosidase and lactose permease genes have been identified, but it degrades lactose slowly. In this study, it was confirmed that the difference in lactose degradation ability depends on the presence or absence of two genes, Lac Z (β-galactosidase) and Lac Y (lactose permease).

한국어

유당 분해능을 확인하는 시험은 대표적으로 MacConkey 배지 배양과 ONPG 시험이다. 그러나 일부 균주 들은 유당을 분해함에도 두 시험의 생화학적 성상이 다르게 나타난다. 이에 그람 음성 장내세균 중 Escherichia coli를 포함한 12개 균주를 사용하여 유당 분해 능력을 확인하였다. 유당의 빠른 발효능력은 MacConkey 배지에서, 유당의 느린 분해능력은 ONPG disk를 사용하여 확인하였다. 12개 균주의 DNA를 추출하여 PCR 증폭과 증폭산물 의 염기서열분석법으로 Lac Z와 Lac Y 유전자를 확인하였다. Escherichia coli 외 4개의 균주에서는 MacConkey 배 지 양성과 ONPG 시험 양성으로 두 유전자가 모두 확인되었다. Edwardsiella tarda 외 4개의 균주는 MacConkey 배지 음성과 ONPG 시험 음성으로 두 유전자 모두 확인되지 않았다. Serratia marcescens는 MacConkey 배지 음성 과 ONPG 시험 양성으로 β-galactosidase 유전자는 확인되었으나 lactose permease 유전자는 확인되지 않았다. 본 연구에서 이러한 유당 분해 능력의 차이는 Lac Z (β-galactosidase)와 Lac Y (lactose permease) 두 가지 유전 자의 존재 유무에 따라 다르다는 것을 확인하였다.

목차

요약
Abstract
Ⅰ. 서론
1.1 연구의 필요성
1.2 연구의 목적
Ⅱ. 대상 및 방법
2.1 균주 및 배양용 시료의 제조
2.2 생화학적 성상 확인
2.3 DNA 추출
2.4 프라이머 제작
2.5 PCR 및 전기영동
2.6 염기서열 확인
Ⅲ. 연구 결과
3.1 유당 분해능
3.2 DNA 농도
3.3 PCR 반응
3.4 염기서열 분석 및 생화학적 성상과의 관계성
Ⅳ. 고찰
REFERENCES

저자정보

  • 고유라 Yura-Ko. 을지대학교 임상병리학과 학생
  • 김가은 Gaeun-Kim. 을지대학교 임상병리학과 학생
  • 현성희 Sunghee-Hyun. 을지대학교 임상병리학과 학생, 을지대학교 시니어헬스케어학과 교수

참고문헌

자료제공 : 네이버학술정보

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