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구강상피세포의 배양환경의 차이에 의한 마이크로어레이 기반 유전자 발현의 융복합 분석

원문정보

The Convergence Analysis of Microarray-Based Gene Expression by Difference of Culture Environment in Human Oral Epithelial Cells

손화경

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초록

영어

This study was analyzed about the relationship between culture microenvironment and cell differentiation of HPV 16 E6/E7-transfected immortalized oral keratinocyte(IHOK). By the alteration of culture environment, IHOK-EF and IHOK-EFKGM were obtained, and the modulation of cell properties was observed by cell proliferation assay, immunofluorescence, microarray, and quantitative real-time PCR analysis. IHOK-EF losed the properties of epithelial cells and obtained the properties of mesenchymal cells, and in the result of microarray analysis, genes related to the inhibition of differentiation such as IL6, TWIST1, and ID2 were highly expressed in IHOK-EF. When the culture environment was recovered to initial environment, these changes were recovered partially, presenting the return of genes involved in the inhibition of differentiation such as IL6, and ID2, particularly. This study will contribute to understand adjustment aspect for cell surviving according to the change of culture microenvironment in the study for determining the cell characteristic, and facilitate therapeutic approach for human disease by applying surviving study according to the change of cancer microenvironment.

한국어

이 연구는 HPV 16 E6/E7 도입 불멸화 구강상피세포의 배양 미세환경과 세포 분화간의 관계를 분석하였다. 배양환 경을 변화시켜서 IHOK-EF 세포와 IHOK-EFKGM 세포를 얻었고, 이들 세포의 특성변화를 세포증식분석, 면역형광분석 및 마이크로어레이와 실시간 정량 PCR분석으로 알아보았다. IHOK-EF 세포는 상피세포의 특성을 상실하고 간엽세포의 특성을 획득하였고, 마이크로어레이 분석결과, 분화억제 유전자인 ID2, IL6, TWIST1이 과발현 되었다. 이러한 변화는 초기 의 배양환경으로 회복되었을 때, 특별히, ID2와 IL6에서 유전자발현의 복귀를 나타내면서 세포의 특성이 부분적으로 회복되 었다. 이 연구는 세포의 특성을 결정하는 연구에서 배양 미세환경의 변화에 따른 세포의 생존을 위한 적응양상을 이해하는 데 공헌할 것이며, 향후, 암세포의 미세환경변화에 따른 생존연구에 적용하여 질병에 대한 치료적 접근을 가능하게 할 것이다.

목차

요약
Abstract
1. 서론
2. 연구재료 및 방법
2.1 세포 배양
2.2 세포증식 분석
2.3 역전사(Reverse transcriptase, RT)-중합효소연쇄반응(Polymerase Chain Reaction,PCR)
2.4 면역형광분석
2.5 마이크로어레이 데이터 분석
2.6 실시간 정량 PCR
3. 연구결과
3.1 배양조건의 변경에 의한 IHOKs의 변화
3.2 IHOK-EF로부터 IHOK-KGM로의 특성 회복분석
3.3 마이크로어레이에 의한 계층군집과 기능적 분류
3.4 마이크로어레이 데이터의 검증
4. 고찰 및 결론
REFERENCES

저자정보

  • 손화경 Hwa-Kyung Son. 영남이공대학교 치위생과 교수

참고문헌

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