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정액을 동결하여 가축유전자원으로 보존하는 것은 국가 유전자원을 확보하는 가장 기 본적인 기술로 중요도가 높으며, 소의 경우 동결정액 생산기술은 상용화가 이루어진 기 술로 인공수정과 체외수정에 가장 많이 이용되는 기술이다. 그럼에도 불구하고, 희소한우 의 경우, 동결 정액의 생존성과 활력도가 균일하지 못한 것이 현실이며, 이는 개체의 차 이에 의한 것으로 판단된다. 본 연구에서는 희소한우의 동결정액의 효율을 높이기 위하 여, 본 연구에서는 비타민 B12의 전구물질인 pyridoxine을 첨가하여 동결과정에서 생존성 을 조사하였다. 동결정액을 제조하는 방법은 1단계 동결방법을 이용하였으며, triladyl 희 석액을 이용하였다. 상온에서 신선정액을 80～120×106개/mL 농도로 맞추고, 저온 중탕법 으로 2시간에 걸쳐 상온에서 5℃로 서서히 냉각하였으며, 동일한 방법으로 pyridoxine이 함유된 2차 희석액으로 1:1로 희석하여, pyridoxine의 최종 농도가 5, 50, 100 및 200 μM 로 조정하여 첨가하지 않은 대조군과 비교 검토하였다. 정액의 동결은 스티로폼을 활용 한 간이 동결법으로 동결을 실시하였으며, 질소 표면 위 5 cm에서 10분간 노출하여 동 결스트로를 제작하였다. 37℃에서 40초간 융해 후 정자의 생존성을 조사하였을 때, 대조 군과 실험군의 유의적 차이가 나타나지 않았으나, computer assisted sperm analysis를 실시하였을 때, 활력도가 우수한 정자의 분포도가 농도 의존적으로 증가하는 것으로 관 찰되었다. 그러므로 유전자원으로 보존되는 정자의 생존율에는 pyridoxine은 큰 효과가 없는 것으로 판단되나, 정자의 장수성과 연관된 활력도를 증진시키는 것으로 판단되며, 그 세포생물학적 기능은 추후 연구를 통하여 구명될 것으로 판단된다.