earticle

한국어

본 연구는 돼지 정자의 성 분리 후 X, Y 정자에서 발현되는 단백질 차이를 분석하였 다. 정액은 국립축산과학원 양돈과에서 개량용으로 사육중인 듀록 수컷으로부터 채취하 였으며, 성 분리에 사용하기 전에 희석 액에 액상 처리하여 분리에 적용되었다. 정자의 성 분리 방법으로는 마그네틱 비드(magnetic bead)를 이용한 방법을 이용하였으며, 일반 적으로 포유류의 Y-정자는 양성전자를 갖고 있으므로 Y-정자를 마이크로 비드로 결합시 키고, 마이크로 비드를 자력을 이용해서 제거하는 방법을 사용했다. 정자 분리에 이용된 자력은 5,000∼7,000 가우스의 자석이 사용되었고, 정자의 부착력을 고려했을 때 직사각 형의 자석이 가장 효율적인 것으로 알려져 있음. 염화칼슘(0.05∼3 g/증류수 100 mL)이 포함된 정자 희석액(플라보노이드 당 포함)을 이용하여 전하의 경쟁을 유도하였고 정자의 분리 이동 속도와 결합도의 차이를 크게 함으로서 마그네틱 비드가 Y-정자에 특이적으로 결합하게 하였다. 분리한 X와 Y 정자는 two-dimensional (2D) polyacrylamide gel electrophoresis( PAGE) 방법을 이용하여 X와 Y 정자에 존재하는 단백질 발현 패턴을 분석하였 다. X와 Y 정자의 Image analysis 결과, pH가 낮은 산성 쪽에서 단백질 spot이 나타나고 있었으며 차후 LC-MS/MS 분석을 통해 단백질 동정을 예정하고 있다.