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Poster Presentation : Cryopreservation

칡소 동결정액 제조 시 저온 저장 시간이 정자 생존율에 미치는 영향

초록

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본 연구는 칡소의 동결정액 생산 시 항동해제 첨가 후 저온 저장 시간이 정자 생존성 및 운동성 등에 미치는 영향을 조사하고자 수행하였다. 공시축의 사양관리는 한우사양관 리(국립축산과학원, 2007) 기준에 준하여 사육하였다. 공시축은 정액채취를 위해 승가훈 련이 완료된 칡소 3두를 공시하였고 정액채취 빈도는 주 1회로 하였다. 정액 채취는 공시축의 승가 유도 후 인공질을 활용 채정을 실시하였고 위상차 현미경 하에서 생존율이 80∼90%로 검경된 원정액으로 동결정액 생산에 활용하였다. 동결보존 희석액의 기본조성은 Tris(hydroxymethyl)amino-methane 250 mM, Citric-acid monohydrate 80 mM, Fructose 60 mM, Penicillin G Streptomycin 1%, Egg-Yolk 20%, Glycerol 7% 농도로 하여 본 실험에 공시하였다. 동결정액의 생산은 채취된 원정액을 1차 희석 한 다음 저온 저장실로 이동하여 2차 희석 및 Glycerol 평형을 1시간 유도한 다음 0.5 mL Straw에 충진시켜 액체질소를 활용한 간이 급속 동결을 실시하였다. 융해 후 정자 특 성분석은 위상차 현미경과 컴퓨터정자분석기(Computer Assisted Sperm Analysis)를 활용 하여 생존율, 운동성, 선형성, 직진도 등을 Glycerol 평형직후, 4, 8, 12, 24시간 경과 후 각각 검사한 결과 생존율은 평형직후, 4, 8, 12, 24시간(75, 75, 70, 70, 55%)였고 운동성 은 12, 8시간, 평형직후, 24, 4시간(78.8, 78.5, 77.5, 76, 74.6%) 순이었으며, 선형성은 4 시간, 평형직후, 12, 8, 24시간(47.1, 49.5, 51.6, 51.8, 53%) 순으로 낮은 경향을 보였다. 직진도는 평형직후, 4, 8, 12, 24시간(61.2, 66.3, 68, 70.8, 70.8%) 순으로 낮은 경향을 보였다. 금번 연구 결과는 동결보존 희석액에 첨가되는 항동해제인 Glycerol을 첨가한 이 후 저온 저장 조건을 유지함으로써 정자의 가사상태 유지 및 정자의 운동성 등을 억제시 킨 결과로 항동해제 평형시간이 경과함에 따라 생존율 등은 다소 낮아지는 것으로 조사 되었다. 이는 정자의 체외 배출 이후 온도, 삼투압충격 및 대사에너지 소모에 따른 자연 사멸 등의 요인으로 저장시간이 경과함에 따라 생존율에 영향을 미쳤을 것으로 판단된 다. 위와 같은 결과는 동결정액 생산 기반 시설이 없는 농가 또는 타기관 보유 칡소 동 결정액 공유를 위해 사육 현장에서 채정 및 동결보존 희석 처리 시킨 다음 저온 조건을 유지시켜 생산이 가능한 장소로 이동 동결정액을 생산함으로써 시·공간적인 제약 해결이 가능하여 가축유전자원 보존·증식에 기여할 것으로 사료된다.

저자정보

  • 유대중 전라남도농업기술원 축산연구소
  • 최영선 전라남도농업기술원 축산연구소
  • 구민정 전라남도농업기술원 축산연구소
  • 김기수 전라남도농업기술원 축산연구소
  • 정광욱 전라남도농업기술원 축산연구소
  • 조창연 농촌진흥청 국립축산과학원
  • 김승창 농촌진흥청 국립축산과학원
  • 김관우 농촌진흥청 국립축산과학원

참고문헌

자료제공 : 네이버학술정보

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