원문정보
JNK-AP1 기전을 통한 국화꽃 추출물의 MMP1 발현 변화 조절
초록
영어
Purpose: Chrysanthemum morifolium flower, Chrysanthemum indicum Linne (C. indicum Linne), contains various antioxidants which are used to care cold, headache, dizziness, and hypertension in Korea, China, and Japan. However, in dermis, effects of C. indicum Linne are not understood, currently. Thus, in present study, we suggest an evidence that C. indicum Linne decreases skin aging by regulating extracellular matrix of dermis. Methods: Dried C. indicum Linne was extracted with 70% ethanol and concentrations of this experiment were determined by cytotoxicity with MTT assay. Matrix metalloprotease 1 (MMP1) mRNA expression was confirmed by qRT-PCR and activity of AP1 promoter was measured with pGL-TRE luciferase reporter vector. Moreover, protein expression of JNK and p-JNK was assessed by western blot. Results: As shown results, we demonstrated that C. indicum Linne extracts decreased MMP1 expression induced by oxidative stress. In addition, C. indicum Linne extracts repressed MMP1 transcription by regulating AP1 transcriptional activity. Lastly, we demonstrated AP1 was regulated by blocking phosphorylation of JNK. Overall, C. indicum Linne extracts regulates MMP1 expression using JNK-AP1 pathway. Conclusion: C. indicum Linne extracts has potential to reduce aging and formation of wrinkle and to use as a cosmetic ingredient.
한국어
목적: 국화꽃은 다양한 항산화 물질을 내포하고 있어 한국, 중국 일본 등지에서 예로부터 감기, 두통, 어지러움, 고혈압 등에 사 용되어 왔다. 그러나 지금까지 피부 진피에 국화꽃이 미치는 영향에 대해서는 잘 알려지지 않았다. 따라서 본 연구진은 실험을 통 해, 국화꽃이 진피층의 세포외기질을 조절하여 피부노화를 경감시킬 수 있음을 제시하였다. 방법: 실험에 사용한 국화꽃 추출물 은 건조한 국화꽃을 분쇄하여 70% ethanol을 사용하여 침출하였고, MTT assay를 통해 세포독성실험과 이후 실험에 사용할 농도 를 정하였다. qRT-PCR을 이용하여 MMP1의 mRNA 발현 변화를 확인하였으며, pGL-TRE luciferase reporter vector를 활용 하여 AP1의 promoter 활성을 측정하였다. JNK와 p-JNK의 단백질 발현은 western blot을 통해 확인하였다. 결과: 실험을 통해 국화꽃 추출물이 산화적 스트레스가 유도하는 MMP1 발현을 감소시키는 것을 증명하였으며 더불어, 이러한 현상이 국화꽃 추출 물이 MMP1의 상위조절인자인 AP1의 전사활성을 조절하는 것으로부터 야기됨을 밝혔다. 마지막으로는 AP1이 JNK의 인산화를 저해하는 기작으로부터 조절되는 것을 증명하여 종합적으로 국화꽃 추출물이 JNK-AP1 경로를 통해 MMP1의 발현을 조절하는 것을 입증하였다. 결론: 본 연구를 통해 국화꽃 추출물이 노화와 주름생성을 경감시킬 수 있는 잠재적인 화장품 원료로서의 가능 성을 확인하였다.
중국어
目的: 菊花含有多种抗氧化物质,在韩国、中国、日本等国家,从以前开始用于治疗感冒,头痛,头晕,高血压。但直到 现在,还未查清菊花对皮肤真皮的影响。因此通过研究,提出菊花具有调节真皮层的细胞外基质, 减少皮肤老化的功效。 方法: 实验中使用的菊花提取物是通过粉碎干燥的菊花,然后利用 70% 乙醇对其进行提取。通过MTT assay 测定细胞毒 性,决定了菊花提取物的使用浓度。利用 qRT-PCR 确认 MMP1 的表达变化,利用 pGL-TRE luciferase reporter vector 测定 AP1的 promoter 活性,利用 western blot 确认 JNK 和 p-JNK的蛋白质表达。结果: 通过实验菊花提取物降低氧化应激诱导 的MMP1表达,产生这种现象的原因是菊花提取物调节MMP1 上位调节因子 AP1的转录。而 AP1阻断JNK的磷酸化,因此菊 花提取物通过JNK-AP1途径调节 MMP1的表达。结论: 通过研究菊花提取物作为潜在的化妆品原料时,具有降低老化和皱 纹产生的功效。
목차
Introduction
Methods
1. 세포배양
2. 국화꽃 추출물 제조
3. 세포독성실험
4. MMP1 mRNA의 발현변화 확인
5. AP1 promoter 활성 측정
6. JNK 활성 측정
Results and Discussion
1. 인간진피섬유아세포에서 국화꽃 추출물의 세포독성 확인
2. 인간진피섬유아세포에서 국화꽃 추출물의 산화적 스트레스에 의해 유도된 MMP1 발현 조절 확인
3. 인간진피섬유아세포에서 국화꽃 추출물에 의한T RE의 활성 변화
4. 인간진피섬유아세포에서 국화꽃 추출물에 의한 JNK의 활성변화
Conclusion
References
국문초록
참고문헌
中文摘要