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Tetracycline 유도적인 RNAi System을 이용한 생쥐 성장 관련 유전자의 발현 억제

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Inhibition of mIGF-1 and mGHR Gene Expression using Tetracycline-Inducible RNAi System in Mouse Liver Cell

손혜진, 구본철, 권모선, 이영만, 김태완

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초록

영어

In this study, to further understand the mechanism of animal growth and to develop a miniature transgenic animal model, we constructed and tested tetracycline-inducible RNAi system using shRNA targeting the mRNA of mouse insulin-like growth factor (mIGF-1) or mouse growth hormone receptor (mGHR) gene. Quantitative real-time PCR analysis of mouse liver cell (Hepa1c1c7) cells transfected with these vectors showed 85% or 90% of expression inhibition effect of IGF-1 or GHR, respectively. In ELISA analysis, the protein level of IGF-1 in the cells expressing the shRNA targeting IGF-1 mRNA was reduced to 26% of non-transformed control cells. Unexpectedly, in case of using shRNA targeting GHR, the IGF-1 protein level was decreased to 75% of control cells. Further experiments are needed to explain the lower interference effect of GHR shRNA in IGF-1 protein. Accumulated knowledge of this approach could be applicable to a variety of related biological area including gene function study, gene therapy, development of miniature animals, etc.

목차

ABSTRACT
 서론
 실험 방법
  shRNA 합성
  생쥐 shRNA를 도입한 Tet Vector System의 유전자 발현의 Knock-Down 효과 검정
 결과
  Tetracycline 유도적인 Retrovirus Vector System을 이용한 mIGF-1i의 Knock-Down 효과 검정
  Tetracycline 유도적인 Retrovirus Vector System을 이용한 mGHRi의 Knock-Down 효과 검정
  단백질 수준에서의 mIGF-1i와 mGHRi의 Knock-Down 효율 양상 확인
 고찰
 인용문헌

저자정보

  • 손혜진 Hye Jin Son. 대구가톨릭대학교 의과대학 생리학교실
  • 구본철 Bon Chul Koo. 대구가톨릭대학교 의과대학 생리학교실
  • 권모선 Mo Sun Kwon. 대구가톨릭대학교 의과대학 생리학교실
  • 이영만 Young Man Lee. 대구가톨릭대학교 의과대학 생리학교실
  • 김태완 Teoan Kim. 대구가톨릭대학교 의과대학 생리학교실

참고문헌

자료제공 : 네이버학술정보

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