원문정보
Apoptosis and Development of Porcine Parthenogenetic Embryos Activated and Cultured in Different Condition
초록
영어
This study investigated apoptosis and in vitro development of parthenogenetic preimplantation porcine embryos. In vitro matured oocytes for 42~44h were used. Apoptotic cell death was analyzed by using a terminal deoxynucleatidyl transferase mediated deoxyuridine 5-triphosphate nick-end tabling (TUNEL) assay. In experiment 1, oocytes were activated with two electric pulses (CH) of 1.2 kV/cm for 30μsec (E), E + 6-dimethylaminopurine (6-DMAP) or E + cycloheximide (CH) and cultured in PZM-3 under 5% CO2 in air at 38.5℃. In experiment 2, oocytes were activated by E and cultured in PZM-3 or NCSU-23 under a gas atmosphere of 20% O2 (5% CO2, in air) or 5% O2 (5% CO2, 5% O2 90% N2) at 38.5℃. Oocytes activated with E+6-DMAP or E+CH showed higher blastocyst rates (36.3% and 32.5%) compared to E alone (27.7%). The frequency of apoptosis according to treatments were 5.3%, 7.7% and 7.1% respectively. Oocytes activated with E alone showed lower (P<0.05) frequency of apoptosis compared to other groups. In experiment 2, parthenotes cultured in PZM-3 showed slightly higher blastocyte rates (28.2% and 29.7%) compared to NCSU-23 (22.6% and 24.4%) regardless of atmosphere. Blastocysts generated in PZM-3 showed lower (P<0.05) apoptosis rate under 20% O2 (9.2% vs 16.9%), whereas those in NCSU-23 had slightly lower apoptosis rate under 5% O2 (14.0% vs 18.4%). This result represents that activation method and culture condition could affect the frequency of apoptosis as well as in vitro developmental rate.
한국어
본 연구는 활성화처리 방법 및 배양 조건이 돼지 단위발생란의 체외발달 및 apoptosis에 미치는 영향을 알아보기 위해 실시되었다. 도축장 유래 난소로부터 채취된 미성숙 난자를 42~44시간 동안 성숙배양한 후 사용하였다. Apoptosis는 TUNEL 방법을 사용하여 조사하였다. 실험 1에서는 성숙배양된 난자들을 electric pulse(1.2 kV/cm for 30μsec 2회, E), E + 6-dimethylaminopurine(6-DMAP) 또는 E + cycloheximide(CH) 방법으로 활성화 처리하여 PZM-3를 이용하여 5% CO2, 38.5℃에서 배양하였다. 실험 2에서는 전기자극을 이용하여 활성화처리된 난자들을 각각 PZM-3 또는 NCSU-23 배양액 내에서 배양하였다. 각 배양액 내의 난자들은 각각 20% O2 조건으로 나뉘어 배양하였다. E + 6-DMAP(36.5%) 또는 E + CH 구(32.5%)에서 E 구(27.7%)보다 유의적으로 높은 배반포 형성율을 보였다(P<0.05). 처리별 apoptosis 발생율은 각각 5.3%(E), 7.7%(6-DMAP) 및 7.1%(CH)였다. 실험 2에서는 PZM-3 구의 배반포 형성율이 NCSU-23 구에 비하여 산소분압조건과 관계없이 다소 높았다(28.2{sim}29.7% vs. 22.6~24.4%). PZM-3 및 20% O2 조건하에서 유의적으로 낮은 apoptosis 발생 비율을 나타냈다(9.2%, P<0.05). 그러므로 돼지 단위발생란을 chemical agent를 이용한 추가 활성화처리 후 PZM-3, 20% O2, 조건으로 배양하면 더 나은 배반포 발생율을 얻을 수 있다고 생각된다.
목차
서론
재료 및 방법
결과
고찰
인용문헌