원문정보
Properties of Carbohydrase Prepared from Lipomyces starkeyi JLC26
초록
영어
We have isolated a dextranase and amylase constitutive and hyper-producing mutant, Lipomyces starkeyi JLC26, from Lipomyces starkeyi ATCC74054 after mutation using UV irradiation. After partial purification of dextranase and amylase (together DXAMase;both activities were always co-purified) by ammonium sulfate precipitation, CM-Sepharose column chromatography, the specific activities of amylase and dextranase were 5367 and 3045 unit/mg, respectively. The pH effects for activity and stabiligy of both enzymes were similar to each other: Optimum pH and temperature for activity sere at 5.5 and 37℃ and optimum ranges for stability were at pH 2.5-5.5 and 4-55℃, respectively. The reaction end products of dextranase and amylase activities were found to the typical for those of endo-dextranase and endo-amylase. When the carbohydrase and maltotriose were reacted, glucose, maltose, isomaltose, maltotriose, panose and (1→6)glucosylmaltotriose were produced by disproportionation reaction.
한국어
Lipomyces starkeyi ATCC 74054를 UV로 돌연변이하여 선발한 JLC26의 효소적인 특성을 알아보았다. 효소는 70% ammonium sulfate로 침전시키고, CM-Sepharose column chromatography로 부분 정제하였다. 이때 얻어진 각 효소 specific activity는 amylase 활성의 경우는 5367 unit/mg이었고 dextranase 활성의 경우는 3045 unit/mg이었다. 효소의 최적 pH와 온도는 5.5와 37℃였으며, pH 2.5-5.5와 4-55℃에서 안정성을 보였다. 부분 정제된 효소는 amylase와 dextranase 활성을 동시에 보이는 100 KDa의 크기를 가지는 하나의 단백질이었다. 이 효소는 maltotriose 기질과 반응할 때 disproportionation reaction 현상을 보여 가지구조를 지닌 panose와 a(1→6)glucosylmaltotriose을 생산하였다. 이 균은 starch 배지에서 키워 amylase와 dextranase 활성을 동시에 지니는 효소를 생산함으로써 dextran과 mutan은 구성된 치태를 분해하는 효소재료로의 이용성이 기대된다.
목차
재료 및 방법
사용균주
돌연변이 과정 및 선별
효소 생산
단백질 정량
효소 활성
최적 pH 및 온도
SDS-PAGE
Disproportionation reaction
결과 및 고찰
균 선발
효소의 정제 및 특성
Disproportionation reaction
요약
감사
REFERENCES