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현장에서 초음파 파쇄와 형광시약을 이용한 그람 음성균의 조기 탐지

원문정보

The Early Detection of the Gram Negative Bacteria using Sonification and Fluorescent Dye in the Field

하연철, 최기봉, 최정도

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초록

영어

This study was carried out to establish the optimum condition for cell disruption with a sonificator in the detection of the
gram negative bacteria, E. coli for the purpose of developing automatic fluorometer. The efficiency of sonification on the E.
coli disruption was greatly dependent on the diameter of sonificator probe tip. The larger sonificator probe diameter showed
greater disruption effect. Sonificator probe of 13 mm diameter was the most efficient one for E. coli when sonificated for 20
seconds. The efficiency of the E. coli disruption differed greatly according to the depth of sonificator probe tip sank in the
sample solution. The shorter the distance between probe tip end and the bottom of the container, the higher the disruption
efficiency. The detection limit of E. coli was 5 × 105 CFU/㎖ when sample was sonificated for 20 seconds with a sonificator
probe of 13 mm diameter.

한국어

본 연구에서는 sonificator를 장착하여 세포막을 파쇄하고 현장에서 형광을 이용하여 조작이 간편하고 단시간에 DNA를 측정할 수 있는 자동화된 형광기를 개발하기 위하여 그람 음성균인 Escherchia coli를 대상으로 최적의 세포파쇄조건을 확립하고자 하였다.
Incubation time은 형광량에 크게 영향을 주지 못하는 것으로 나타났으며, 가열처리 방법은 현장에서 세포를 파괴하는 방법으로는 파쇄효과가 미약하고 적합하지 않은 것으로 나타났다.
Sonificator probe 직경에 따라 세포의 파쇄 효과가 큰 차이를 보였으며 13 ㎜ probe로 20초 동안 sonification시키는 것이 가장 효율적인 것으로 나타났다. 시료에 잠긴 Sonificator probe tip 깊이에 따라서도 세포의 파쇄 효과가 크게 나타났는데 시료에 잠긴 probe tip의 깊이가 깊을수록 큰 파쇄 효과를 발휘하였다. 선정된 최적의 파쇄 조건에서 5 × 105 CFU/㎖의 Escherchia coli를 탐지 가능한 것으로
나타났다.

목차

Abstract
 서론
 재료 및 방법
  균주 및 재료
  생균수 측정 및 기기분석
  DNA의 sonification 효과
  Incubation time 설정
  가열처리
  시료에 잠긴 Sonificator probe tip 깊이
  Sonificator probe 직경별 및 처리시간
  형광시약 농도별 탐지농도
 결과 및 고찰
  DNA의 sonification 효과
  Incubation time 설정
  가열처리
  시료에 잠긴 Sonification probe tip 깊이
  Sonificator probe 직경 및 처리시간
  형광시약 농도별 탐지농도
 요약
 REFERENCES

저자정보

  • 하연철 Yeon-chul Ha. 국방과학연구소 1-2-1
  • 최기봉 Ki-bong Choi. 국방과학연구소 1-2-1
  • 최정도 Jung-do Choi. 충북대학교 생화학과

참고문헌

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