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인체 폐섬유아세포 배양에 의한 수두바이러스의 생산

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Production of Varicella-zoster Virus Using Human Lung Fibroblast Cells As Host Cells

김원배, 박정극, 최원상, 김수옥, 정용주, 김현수, 김익환

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초록

영어

Attenuated varicella-zoster virus (VZV) was propagated in human lung fibroblast (HLF) cells Among media tested in this work, DMEM was the best medium for the growth of HLF cells. Because HLF was a normal finite cell line, cell growth late was dependent on the age of HLF cells. When the population doubling level (PDL) was higher than 46, apoptosis of HLF cells started and cell growth rate decreased. The optimum temperature for the cell growth and virus propagation in the T-flask culture was 37℃. In a microcarrier culture system in which Cytodex-3 was used for the VZV propagation in spinner vessels, the yield of plaque forming cells was lower than that in the T-flask culture. The relatively high shear environment near microcarriers was thought to cause the low yield of VZV in the microcarrier culture system.

한국어

수두 바이 러스(Varicella-zoster virus, VZV) 백신을 생산하기 위하여 약독화된 수두 바이러스 주인 Oka 주를 사용하여 정상세포인 인체 폐세 포(human lung fibroblast cells)로부터 수두 바이 러스 생산조건을 검토하였다. 숙주세포의 배양을 위 한 최적 성장배지로는 DMEM이 조사된 배지 중에 서는 가장 좋음을 알 수 있었으며 숙주세포의 성장율은 세포 age의 지표인 population doubling level (PDL) 이 46 이상인 경우 낮아지는 것무로 확인되 었으며 따라서 수두바이러스 생산을 위해서는 PDL 4 46 이하의 young cell을 사용해야 할 것으로 사료된 다 한편 수두바이러스 생산을 위한 최적 증식조건 으로는 배양온도37℃ , 혈청농도 2%, MOl 1:5였다. 숙주세포를 대량배양하기 위한 기본조건을 검토 하기 위하여 미 럽담체 (Cytodex-3)를 이용한 spm­n ner flask culture를 시행하였다. 미럽담체에서의 숙 주세포 성장은 T -flask와 비하여 별다른 차이가 없었으나 VZV의 증식은 T-flask 배양에서보다 훨씬 낮았다. 이는 미립담체배양에서의 높은 전단응력 과 미립담체끼리의 영김현상 때문으로 생각된다.

목차

ABSTRACT
 서론
 재료 및 방법
  세포주 및 바이러스 주
  배양액 및 혈청
  숙주세포의 최적 성장배지 선정
  세포 및 바이러스 배양
  미립담체 (Microcarriers)
  바이러스(cell free virus) 회수
  세포수 측정
  Cell age 계산
  바이러스 정량
 결과 및 고찰
  숙주세포의 최적 성장배지 선정
  숙주세포 증식에 대한 PDL의 영향
  바이러스 최적 배양 조건
  미립담체를 이용한 숙주세포배양
  미립담체를 이용한 바이러스 대량배양
 요약
 참고문헌

저자정보

  • 김원배 won-Bae Kim. 동국대학교 화학공학과
  • 박정극 Jung-Keug Park. 동국대학교 화학공학과
  • 최원상 Weon Sang Choi. 동국대학교 생화학과
  • 김수옥 Soo-Ok Kim. 제일제당(주)
  • 정용주 Yong-Ju Chung. 제일제당(주)
  • 김현수 Hyun-Su Kim. 제일제당(주)
  • 김익환 Ik-Whan Kim. KIST 생명공학연구소

참고문헌

자료제공 : 네이버학술정보

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