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Pluronic F-68이 동결보존된 형질전환 담배세포의 해동 후 세포생장에 미치는 영향

원문정보

Effect of Pluronic F-68 on the Post-thaw Growth of Cryopreserved Transgenic Nicotiana tabacum Cells

전수환, 이경훈, 권준영, 류현남, 김동일

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초록

영어

To enhance the growth of cryopreserved cells of transgenic Nicotiana tabacum, Pluronic F-68 was supplemented in a recovery medium during post-thaw period. As cryoprotective agents, 1 M sucrose, 0.5 M glycerol and 0.5 M dimethyl sulfoxide (DMSO) were added before freezing steps. The post-thaw growth of the cells was improved with Pluronic F-68, ranged from 0.1 to 10 g/L. The interactions of Pluronic F-68 with the cells were confirmed by the changes of hydrophobicity or permeability of the cells. Pluronic F-68 did not show any effect on the activity of β-glucuronidase (GUS) in all treatments. Therefore, the addition of Pluronic F-68 in a recovery medium was found to be beneficial to enhance the post-thaw growth of cryopreserved transgenic tobacco cells without affecting the production of recombinant protein.

한국어

본 연구에서는 Pluronic F-68을 해동 후 회복배지에 적용하여, 동결보존된 형질전환 식물세포의 생장 증진을 도모하였다. Pluronic F-68은 세포표면의 소수성을 감소시켰을 뿐만 아니라, 세포의 투과성을 증진시켜 세포와 직접 상호작용할 수 있음을 관찰하였다. 또한 Pluronic F-68의 첨가에 의해 재조합단백질의 발현에 부정적인 영향을 보이지 않음을 확인하였다. 따라서 동결보존시 해동 후 회복배지에 Pluronic F-68의 첨가는 식물세포의 신속하고 효율적인 대량 현탁배양을 가능하게 할 수 있다.

목차

Abstract
 서론
 재료 및 방법
  세포배양 및 배지
  세포량 측정
  동결보존 과정
  세포표면 소수성 측정
  세포투과성 측정 (LDH assay)
  β-Glucuronidase (GUS) assay
 결과 및 고찰
  세포표면 소수성의 변화
  세포표면 투과성의 변화
  재조합 단백질의 활성의 변화
  동결보존시, 해동 후 세포생장
 요약
 REFERENCES

저자정보

  • 전수환 Su-Hwan Cheon. 인하대학교 공과대학 생물공학과
  • 이경훈 Kyoung-Hoon Lee. 인하대학교 공과대학 생물공학과
  • 권준영 Jun-Young Kwon. 인하대학교 공과대학 생물공학과
  • 류현남 Hyun-Nam Ryu. 인하대학교 공과대학 생물공학과
  • 김동일 Dong-Il Kim. 인하대학교 공과대학 생물공학과

참고문헌

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