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영어

Matrix Assisted Laser Desorption ionization Time of Flight (MALDI-TOF) was used for enzymes identification related to β -1,3-glucan synthesis. Agrobacterium sp. ATCC31750 was cultivated with two stage Continuous Stirrer Tank Reactor (CSTR) and the cells were harvested and their protein profiles were analysed by two dimensional electrophoresis. The specific enzyme spot was treated with trypsin and analysed by MALDI-TOF to get peptide molecular weight. The peptide molecular weights were matched with Agrobacterium tumefacience's Data Base from the matrix science site, then could identify the avaliable key enzymes. In this study, we identified key metabolite of synthesis of beta-1,3-glucan, such as glucose-6-phosphate isomerase, phosphoglucomutase, β-1,3-glucan synthase and glucokinase, and we also identified uracil
phosphoribocyl transferase and Ribosome recycling factor also.

한국어

본 연구에서는 이차원 전기영동을 통한 단백질분석을 통해 선정한 점들을 MALDI-TOF를 이용하여 peptide 값을 얻었으며 그 peptide 값을 웹 사이트의 데이타베이스와 비교하여 glucose-6-Phosphate isomerase, phosphoglucomutase, β-1,3-glucan synthase, glucokinase와 같은 주요 대사산물들을
검출하였다. 그리고 함께 검출된 단백질에는 uracil phosphoribocyl transferase와 ribosome recycling factor도 있었다. 본 연구에서는 이를 바탕으로 더 많은 연구를 통하여 이미 검출된 단백질에 대한 재검증을 진행하고 더 많은 단백질들을 검출하여 β-1,3-glucan이 생성되는 상세한 합성경로를 밝혀내고자 하였다. 본 연구를 통하여 β-1,3-glucan 합성에 관여하는 단백질들을 밝혀내고 농도를 측정하면 수학적으로 모델링 할 수 있으며, 이를 통하여 세포 내부를 최적화 시켜 글루칸 생산성을 높일 수 있다. 또한, 율속단계의 반응을 찾아 그 반응을 촉진하도록 함으로써 향후 더 높은 생산성을 갖는 변이주를 만드는 것이 가능할 것이다.