earticle

논문검색

연구논문

인간염색체 12q13에 내재한 마우스 Gamm1의 인간유전자 homolog, MYG1의 클로닝과 발현

원문정보

Cloning and Expression of a Human Homolog of Mouse Gamm1, MYG1, Localized in 12q13

양금진, 이형난, 배윤정, 김은민, 신동직, 윤종복, 박영일, 김준, 유지창, 김성주

피인용수 : 0(자료제공 : 네이버학술정보)

초록

영어

Isolation of a gene and determination of its expression pattern are essential in understanding its function. Among the genes localized in 12q13, stSG3435 EST was chosen to study its expression pattern. The full-length cDNA was cloned by screening of human brain cDNA library and its sequence was determined by serial deletion followed by automated sequencing of the clones with overlapping fragments. The sequence analysis revealed that stSG 3435 cDNA displayed 100% identity to human MYG1 and 86% identity to mouse melanocyte proliferation gene-1 (Gamm 1) originally identified from melanocyte, suggesting that MYG1 was the human homolog of mouse Gamm1. The tissue specific expression of MYG1 determined by Northern blot analysis revealed the strongest expression in testes with ubiquitous expression in all the tissues tested. In order to investigate the cellular localization of its protein product, the green fluorescence protein gene was fused into the full-length coding sequence of MYG1. Transfection of the fusion construct followed by confocal microscopy resulted in the green fluorescence signal as a punctate state in cytoplasm indication that MYG1 was localized in one of the cellular organelles.

한국어

새로운 유전자를 클로닝하고 그 발현양상을 결정하는 것은 유전자의 기능을 이해하는데 필수적이다. 인간유전자 12q13의 고해상 물리지도를 작성하면서 이 지역의 D12S359와 12S1618 사이에 내재하는 것으로 mapping된 stSG 3435 EST의 유전자를 클로닝하고 그 발현양상을 조사하였다. NIB1 library를 조사하여 stSG 3435를 포함하는 클론 325E4를 분리하여 순차적 결실 방법으로 클로닝하여 자동염기서열
분석으로 염기서열을 결정하였다. 1,331 bp의 염기서열을 가진 이 유전자는 Blast search에 의하면 376 개의 아미노산으로 이루어진 단백질로써 인간의 MYG1과 동일하며 마우스의 Gamm1, melanocyte proliferation gene 1과 86%의 동질성을 보였다. MYG1은 인간염색체의 12에 내재하며 마우스의
Gamm1은 syntenic 부위인 마우스 염색체 15에 내재하므로 마우스의 Gamm1의 homolog으로 간주된다. Northern blot analysis 결과 MYG1은 인간의 모든 조직에서 발현되며 정소에서 가장 강한 발현을 보였다. 이 유전자의 세포내 발현을 green fluorescence protein과 융합시켜 발현 귀착지를 confocal
현미경으로 동정한 결과 MYG1 단백질은 핵과 리소좀을 제외한 소기관에서 발현되는 것을 관찰하였다.

목차

Abstract
 서론
 실험재료 및 실험방법
  실험재료
  세포배양
  pBS-325E4 클로닝과 염기서열 결정
  Northern blot analysi
  대장균에서의 단백질 발현 확인
  pEGFP-MYG1 클로닝 및 Confocal 현미경을 통한 동물 세포에서의 유전자 발현 확인
 실험결과 및 고찰
  MYG1의 클로닝 및 염기서열 분석
  MYG1 유전자의 조직 특이 발현
  대장균에서 MYG1 부분 발현
  세포내 발현위치 동정
 요약
 REFERENCES

저자정보

  • 양금진 Keumjin Yang. 가톨릭의과학연구원
  • 이형난 Hyoungnam Lee. 가톨릭의과학연구원
  • 배윤정 Younjung Bae. 가톨릭의과학연구원
  • 신동직 Dongjik Shin. 가톨릭의과학연구원
  • 김은민 Eunmin Kim. 가톨릭의과학연구원
  • 윤종복 Jong-Bok Yoon. 연세대학교 생화학과 PNRC
  • 박영일 Youngil Park. 연세대학교 생화학과 PNRC
  • 김준 Jun Kim. 고려대학교 생명공학원
  • 유지창 Jichang Yu. 가톨릭대학교 의과대학 병리학교실
  • 김성주 Sungjoo Kim. 가톨릭의과학연구원

참고문헌

자료제공 : 네이버학술정보

    함께 이용한 논문

      ※ 원문제공기관과의 협약기간이 종료되어 열람이 제한될 수 있습니다.

      0개의 논문이 장바구니에 담겼습니다.