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연구논문

키티나제에 의한 키토올리고당의 생성활성 규명과 올리고당의 당별 분리 생산

원문정보

Action Patterns of Chitinase and Separations of Chitooligosaccharides Produced by Chitinolytic Hydrolysis

김광

초록

영어

N-acetyl-D-glucosamine oligosaccharides [(GlcNAc)n] whose degree of polymer-ization is from one to ten (n=1-10) were fractionated by column chromatography on CM-Sephadex. Electro dialysis from a partially deacetylated chitosan hydrolysate prepared crudely with the N-acetyl-D-glucosaminidase(chitinase) and exo-N,N'-diacetylchito-biohydrolase(chitobiase) of Serratia marcescens QM B1466. Reducing sugar compositions and sequences of the N-acetyl-glucosamine oligosaccharides were identified by N-acetylation, randomly cleavage with chitinase and exo-splitting with chitobiase.
N-acetyl-glucosamine heterochitooligosaccharides with glucosamine oligosaccharides ; (GlcN)n at the reducing end residues together with (GlcN)1 ~(GlcN)4 were detected. Separation was accomplished by prefractionation with elution by 0 to 1.0 M NaCl gradient solution. (GlcNAc)1=4.25%, (GlcNAc)2=4.49%, (GlcNAc)3=11.1%, (GlcNAc)4=2.5%, (GlcNAc)5 =0.64%, (GlcNAc)6=2.12% and (GlcNAc)7=1.21%,respectively,were crystallized after electrodialysis and lyophilization. Each N-acetyl-D-glucosamine oligosaccharides content were detected by HPLC.

한국어

중합도 n≤10을 갖는 N-아세틸-D-글루코사민(GlcNAc)을 미생물 Serratia marcesce-ns QM B1466의 최소배지 회분식 발효를 이용하여 키틴 및 키토산을 분해하는 효소 키티나제(1.5 unit/mL) [키토바이아제(3.48 unit/mL)가 포함됨]를 생성시킨다. 효소 반응에 의한 키토올리고당의 생성 활성을 규명하기 위하여 부분적으로 탈아세틸화된 키토산을 효소적 가수분해 반응시킴으로써 생성된 N-아세틸-D-글루코사민과 D-글루코사민의 키토올리고당의 생성 패턴을 확인 조사한다. 이혼합 올리고머로부터 CM-Sephadex의 컬럼 크로마토그래피에 의하여 당별로 분획시켜 추출한 헤테로 키토 올리고당들을 각각 N-아세틸화하고 이 최종 생성물을 전기투석 장치로서 정제하여 키토올리고 1-7당을 제조하였다. 부분적으로 탈아세틸화 키토산(환원당으로서 2697 mg/mL)을 효소반응에 의해 생성시킨 키토올리고당은 1당으로서 GlcNAc=4.25%, 2당(GlcNAc)2=4.49%, 3당(GlcNAc)3=11.1%, 4당(GlcNAc)4=2.5%, 5당(GlcNAc)5=0.64%, 6당(GlcNAc)6=2.12%, 7당(GlcNAc)7=1.21%가 각각 제조되었다.

목차

Abstract
 서론
 재료 및 방법
  Serratia marcescens QM B1466 의 배양
  기질 제조
  키티나제 활성과 환원당 측정
  고성능 액체 크로마토그래피법(HPLC)
  헤테로 키토올리고당의 N-아세틸화에 의한 N-아세틸-D-글루코사민 올리고당으로의 변환
  부분 탈아세틸화 키토산의 효소 키티나제에 의한 가수분해
 결과 및 고찰
  기질특이성에 따른 Serratia marcescens 효소활성 규명
  75-99%의 부분 탈아세틸화한 키토산의 효소 키티나제에 의한 가수분해율
  키티나제와 키토바이아제의 효소 가수분해에 의해 생성된각종 키토올리고당의 분석
  고성능 액체크로마토그래피법(HPLC)에 의한 올리고당의 확인 분석
 요약
 REFERENCES

저자정보

  • 김광 Kwang Kim. 동아대학교 재료금속화학공학부 화학공학과

참고문헌

자료제공 : 네이버학술정보
  • 1(Reference title not available)
  • 2(Reference title not available)
  • 3Preparation of D-Glucosamine oligosacch-arides by the enzymatic hydrolysis of chitosan
  • 4Enzymatic degradation of chitins and partially deacetylated chitins
  • 5(Reference title not available)
  • 6Study on chitin. V. kinetics of deacetylation reaction
  • 7Purification and characterization of novel chitinases from Streptomyces griseus HUT6037
  • 8Chitinase-overproducing mutant of serratia marcescens
  • 9Enhancement of serum lysozyme activity by injecting a mixture of chitosan oligosaccharedes intravenously in rabbits
  • 10Preparation of carboxymethylchitin

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