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식물세포 Taxus chinensis 배양으로부터의 Paclitaxel 대량 정제 및 특성

원문정보

Purification and Characterization of Paclitaxel from Plant Cell Cultures of Taxus chinensis in Large-Scale Process

김진현, 기은숙, 민범찬, 최형균, 홍승서, 이현수

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초록

영어

In developing a HPLC purification process, it was hoped that a single chromatographic system would be sufficient to obtain pure paclitaxel in high yield. However, no such system was found, due in part to the complex taxoid profile of crude paclitaxel and to the rigorous nature of the product specification. A two step HPLC purification was adopted using reverse-phase separation on C18 as a first step, and normal-phase separation on silica as the final polishing step. Impurity profiles were established and maintained for paclitaxel, which identified and quantified each impurity observed in purified paclitaxel from these two steps, all impurities at or above 0.1% were identified. Results provide information for improving the quality control of paclitaxel production.

한국어

일반적으로 paclitaxel과 유사한 구조를 가진 복잡한 유도체의 분리나 최종 제품에서의 엄격한 규정 등으로 인하여 한 단계의 HPLC system으로 정제하는 것은 상당히 어렵다. 이러한 이유로 두 단계 HPLC system으로 식물세포 배양액으로부터 paclitaxel의 대량 정제를 수행하였다. 즉, 첫번째 단계에서 reverse-phase HPLC column, 두번째 단계에서 normalphase HPLC column을 사용하여 최종 제품을 얻었다. 또한 최종 정제된 paclitaxel 내에 포함되어 있는 불순물 profile 확인, 함량 분석, 그리고 이들 물질들에 대한 분리, 정제 및 동정을 실시하였다. 이들 불순물들 중에서 0.1% 이상되는 것은 모두 6종 (side chain derivative, baccatin III, 10-deacetyltaxol, cephalomannine, taxane derivative, 7-epitaxol)이며 NMR과 MS를 사용하여 화학구조를 분석한 결과 이미 알려진 paclitaxel유도체 또는 전구체와 동일한 물질로 밝혀 졌다. 본 연구 결과는 결국 paclitaxel 생산을 위한 품질관리 (quality control)
와 허가를 위한 자료로 유용하게 사용되어 진다.

목차

Abstract
 서론
 재료 및 방법
  Taxus 식물세포 배양
  Paclitaxel 및 유도체 함량분석
  Crude extract 제조
  Crude extract로부터 taxane derivative의 단성분 분리/정제
  Taxane derivative의 화학구조 분석 및 동정
 결과 및 고찰
  Paclitaxel 정제
  Paclitaxel 특성
 요약
 REFERENCES

저자정보

  • 김진현 Jin-Hyun Kim. (주) 삼양제넥스 생명공학연구소
  • 기은숙 Un-Sook Gi. (주) 삼양제넥스 생명공학연구소
  • 민범찬 Bumchan Min. 삼양사 중앙연구소
  • 최형균 Hyung-Kyoon Choi. (주) 삼양제넥스 생명공학연구소
  • 홍승서 Seung-Suh Hong. (주) 삼양제넥스 생명공학연구소
  • 이현수 Hyun-Soo Lee. (주) 삼양제넥스 생명공학연구소

참고문헌

자료제공 : 네이버학술정보

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