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목적 : 사람 망막아세포종 세포에 발현되어 있는 P2Y11 수용체를 확인하고 생리적 기능의 일부를 규명하고자 하였다. 대상 및 방법 : P2Y11 수용체 활성화를 확인하기 위해 망막아세포종 WERI- Rb-1 세포를 대상으로 칼슘 이미징 기법을 이용하여 세포내 칼슘농도(Ca2+)를 측정하였으며, P2Y11 수용체 mRNA의 발현은 RT-PCR 기법을 사용하였다. 결과 : 1) ATP 투여시 세포내 Ca2+이 증가하였으며, 이는 세포외 Ca2+을 제거하였을 경우에도 유사하게 증가하였다. 2) ATP에 의한 세포내 Ca2+농도의 증가는 세포내 저장소(Endoplasmic reticulum, ER)로부터 동원되는 것으로 나타났다. 3) P2Y11 수용체 효현제인 BzATP 투여시 Ca2+은 ATP에 의한 세포질내 칼슘이온농도의 31.2±3.7%에 해당하였다. 4) RT-PCR 방법을 통해 P2Y11 수용체의 mRNA 발현을 확인하였다. 결론 : 망막아세포종 세포에는 P2Y11 수용체가 발현되어 있으며, P2Y11 수용체를 매개로 한 세포내 칼슘농도의 증가는 세포분화, 증식, 세포사멸, 종양세포로의 병리적 변화 등의 조절기전에 관여하리라 사료된다.
urpose: The present study aimed to identify the characteristics and physiological function of the P2Y11 receptor, a receptor likely expressed in human retinoblastoma cells. Methods: We measured possible P2Y11 signaling in WERI-Rb-1 cells using a Ca2+ imaging technique and RT-PCR. Results: 1) 10 µM ATP elicited a strong but transient increase in Ca2+ in the WERI-Rb-1 cells, and this Ca2+ rise was well maintained after external Ca2+-depletion. 2) ATP-induced Ca2+ response arose entirely through Ca2+ mobilization. 3) P2Y11 agonist (BzATP, 100 µM) increased Ca2+ by 31.2±3.7 % of ATP effect. 4) mRNA for P2Y11 subtype was identified using RT-PCR. Conclusions: P2Y11 purinergic activation can increase the intracellular calcium level through calcium mobilization in undifferentiated retinoblastoma cells, which may play an important role in cell proliferation, differentiation, and even pathologic processes.
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Calcium, P2Y11 receptor, Retinoblastoma cell
