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배경 : 고농도 글리세롤법으로 적혈구를 냉동하면 개방계에서이루어지면 세척 후 24시간 이내 사용해야하나 최근 폐쇄계에서냉동적혈구를 제조하면 해동 세척 후 냉장상태로 2주간 보관이가능해졌다. 국내에 이 방법을 이용한 냉동적혈구의 제조가 아직소개되지 않아 저자는 폐쇄계를 이용하여 냉동적혈구를 제조하고세척 후 냉장상태로 2주 보관하는 방법을 확립하고자 하였다.방법 : 30단위의 적혈구를 고농도 글리세롤법으로 자동화기계인Haemonetics ACP 215를 이용하여 폐쇄계에서 냉동하고 2주 후이를 해동 세척하여 수혈에 적절한지 평가하기 위해 적혈구 회수율과 상층액에서 K+, LDH, 삼투압, 비중을 측정하고 혈액배양을시행하였다. 냉장보관 2주 후 동일한 검사항목을 재 측정하였다.결과 : 적혈구 회수율은 83.7± 2.6% (78.9-88.8%)이었고 세척직후 상층액의 K+, Hb ATP, Hb 2,3-DPG, 비중, 삼투압, LDH는 각 1.33 ± 0.62 mmol/L, 5.2± 1.0 mol/g Hb, 10.37± 2.35mol/g Hb, 1.008± 0.001, 295.0± 3.06 mOsm/kgH 2O, 175.0±39.0 unit/L이었다. 보관 2주 후 측정에서 비중 1.07 ± 0.000, 삼투압 301.3± 3.3 mOsm/kgH 2O, K+ 농도 29.8± 2.7 mmol/L,Hb ATP 3.5 ± 1.1 mol/g Hb, Hb 2,3-DPG 3.7 ± 1.9 mol/gHb, LDH 209.4± 108.4 unit/L이었다. 혈액배양결과상 모두 음성이었다. 결론 : 고농도 글리세롤법으로 자동화기계인 Haemonetics ACP215를 이용하여 폐쇄계에서 동결 해동 적혈구를 제조해 본 결과 수행과정이 용이하고 모든 생화학적 지표가 우수하여 향후 냉동적 혈구의 제조시 활용할 수 있을것으로 생각된다.
Background : The FDA has approved the storage of frozen red blood cells (RBCs) at -80°C for 10 years. After deglycerolization, the RBCs can be stored at 4°C for no more than 24 hours, because open systems are currently being used. We evaluated Haemonetics ACP 215, an automated, functionally closed system, for both the glycerolization and deglycerolization processes. Methods : Thirty packed RBCs that had been glycerolized and stored at -80°C for 2 weeks were thawed, deglycerolized and resuspended in AS-3. The RBCs were then stored at 4°C for 2 weeks. For the evaluation of the procedure, RBC recovery rate, osmolarity, specific gravity, LDH, K+, Hb-2,3 DPG, Hb-ATP, and plasma hemoglobin were tested at day 0 and day 14. Results : The recovery rate of RBCs was 83.7±2.6% (78.9-88.8%). The Hb ATP and 2,3-DPG of RBCs were 5.16±1.0 mol/g Hb and 10.4±2.4 mol/g Hb, respectively, at day 0. The supernatant K+, specific gravity, osmolarity, LDH were 1.3±0.6 mmol/L, 1.008±0.001, 295.0±3.1 mOsm/kgH2O, 175.0±39.0 unit/L, respectively. All measurements were acceptable to allow the RBCs deglycerolized on ACP 215 to be stored at 4°C for 14 days. The blood cultures were negative at day 0 and day 14. Conclusions : Haemonetics ACP 215 provides a closed, automated system for RBC glycerolization and deglycerolization. This study showed that the RBCs that were glycerolized and deglycerolized in the automated instrument and stored in AS-3 at 4°C for 14 days are of an acceptable quality.
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40%glycerol, Frozen RBC, Deglycerolization
