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배경 :ABO 유전형 검사는 간혹 ABO 불일치나 아형을 결정할 때 혈청학적 검사보다 유용한 정보를 제공할 수 있다. 저자들은 제한효소를 사용하지 않고A, B, O allele 뿐 아니라 한국인에서 흔한 cis-AB allele를 검출할 수 있는 간편한 allele-specificpolymerase chain reaction (AS-PCR)을 개발하고자 하였다. 방법 : AS-PCR은 A, B, O allele의염기서열 중 261, 526, 803번째의 염기서열 차이를 이용하여 ARMS (amplification refrac-tory mutation system)으로활용하여 고안한 시발체를 이용하였다. PCR은 2002년 7월부터 2003년 2월까지 광주전남 적십자혈액원의 공혈자 중 기존의 polymerase chain reaction-restric-tion enzyme length polymorphism (PCR-RFLP)법으로 유전형 검사를 실시한 후 -70℃에서 보관하고 있던 60명의 DNA 검체에 실시하였다.결과 :새로 고안한 PCR을 실시한 결과, 기존에 PCR-RFLP로실시했던 결과 즉, A/O (n=10), A/A (n=5), B/O (n=10),B/B (n=5), O/O (n=10), cis-AB/A (n=5), cis-AB/B (n=10), cis-AB/O (n=5)와 모두 일치하였다. 결론 : 새로 고안한 PCR은 한국인의 A, B, O, cis-AB allele들을 검출하는 ABO 유전형 검사로 간편하고, 정확한 방법이다.
Background : Genotyping of ABO gene could be more informative and valuable than serological typing in some situations such as the resolution for ABO discrepancy between the cell typing and serum typing and determination of A and B subgroups. We developed a simple allele-specific polymerase chain reaction (AS-PCR) method without the use of any restriction enzymes to detect the A, B, O, and cis-AB alleles for Koreans. Methods : An AS-PCR was designed with amplification refractory mutation system (ARMS) at nt (nucleotide) 261 (exon 6) and at nt 526, 803 (exon 7) of ABO gene to detect specific nucleotide sequence differences between the ABO alleles. We tested for ABO genotyping 60 DNA samples previously tested by PCR-RFLP and stored at -70℃. These samples had been obtained from blood donors recruited at the Gwangju-Chonnam Red Cross Blood Center between July 2002 and February 2003. Results : With our new PCR method, the genotypes of the 60 samples were found to be A/O (n=10), A/A (n=5), B/O (n=10), B/B (n=5), O/O (n=10), cis-AB/A (n=5), cis-AB/B (n=5), and cis- AB/O (n=10), which were the same results obtained previously with PCR-RFLP. Conclusions : Our AS-PCR is a simple and accurate method for the detection of A, B, O, and cis- AB alleles for Koreans
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ABO, Genotyping, AS-PCR
